尹世刚

  免疫组织化学（IHC）是许多实验室的主要免疫测定方法，用于证明重要蛋白质的存在与否，检测翻译后修饰，诊断疾病等等。IHC使用免疫学和生化技术，通过与目标抗原相互作用的标记抗体来检查不同的组织切片。可见标记或染色剂用于可视化抗体抗原相互作用。IHC可以可视化细胞的独特细胞成分，广泛被病理学家和诊断人员使用。 实验前 1、样品制备 在室温下，用2%多聚甲醛将新鲜解剖的组织( 用流动的自来…

很多时候，我们千辛万苦地染出了一张张漂亮的免疫组化片子。但是却不知道如何正确地分析，得出理想的结果。这实在是一件憾事。其实，免疫组化的protocol教科书和实验手册上面都有。不再重复了。这里，中洪君根据自己做免疫组化数年的经验和体会，谈谈应该注意的一些事项和技巧，并且有独门绝招献上。 免疫组化实验步骤 1.  石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分…

基本原理 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。 分类 1、免疫荧光方法 最…

免疫组化，病理学实验的常用技术，看似容易，其实处处存在陷阱，稍微一不留意，就会掉入坑中而无法自拔。中洪免疫组化小王子：“是这个理，今天我就豁出去，将我多年的心得和经验奉献给你了！” （请耐心花2分钟阅读完本文，建议推荐给小伙伴一起学）  1 原理 抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，…

来源于体外诊断技术支持 在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些局限性。深入研究免疫组化原理和技术，必须熟悉各种抗体真阳性反应部位，实现实验…

“我的WB又没有杂出来，太桑心了” “哇靠你的WB又没有杂出来，用掉多少抗体了，还买进口的！” “哇靠你的WB又没有杂出来，却一直一轮又一轮的占用着蛋白电泳仪，我等到黄花都谢了！” 麦子说，这些声音贯穿了她整个研究生生涯，WB，虐了她无数遍，然而凤凰涅盘然后浴火重生，她从WB中参悟到了正确应对失败的人生道理。而在正确应对失败的同时，我们也要学会如何避免失败。小鱼今天给大家分享一下在用磷酸化抗体做W…

1.确定样本中磷酸化蛋白的表达量 对的样本，正确的处理方法和合适的阳性对照是实验成功的第一步。 对的样本：实验前需先查阅文献或通过预实验检测该样本是否表达，若该样本根本就不表达目的蛋白，那就不要浪费感情了吧； 正确的处理方法：若正常情况下样本的磷酸化水平过低或不表达，可通过物理或化学方法进行一定的刺激和诱导，刺激条件各不相同。但这并不代表刺激越多越好，充分但不过分（如磷酸化IRS1，仅需刺激5mi…

  abcam是世界上最大的高品质抗体供应商之一，成立于1998年，总部位于英国的剑桥科学园，专门生产和分销研究型抗体，已有差不多十余万种抗体和试剂，并以每月上百种新产品的速度不断增加。在2012年，abcam 并购了美国的 Epitomics 公司，成为一家有领导地位的 RabMAbs® 供应商。 当搜索abcam网站，您会发现对于任何一种给定的目标抗原，都有不止一种有效抗体。如何筛选…

ICC/IF？IHC-P？IHC-Fr？IHC-FoFr？还有IHC-wmt？这些傻傻分不清楚？请看这篇文章，Abcam抗体有关IHC/ICC挑选，一篇说透。 免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）有多种不同的实验方法，包括样品制备和/或染色方法的差别。每种实验方法都有一个常用的标准缩写。 Abcam在说明书上使用此标准缩写，来规定每种抗体或试剂适用的样品制备及染色类型，正如Abcam的A…

流式抗体荧光选择技巧： 在进行流式细胞仪多色分析时，如果想得到理想的分析结果，就需要选择好抗体的荧光搭配。常考虑的影响因素有以下几点： 01 荧光素的荧光强度 一个特定抗体，能否区分阴性与阳性结果，靠的是抗体上结合的荧光素标记。每一种荧光素的光量子释放能力不同，相对荧光强度不一样，一般用染色指数（staining index）来比较不同荧光标记的光信号强度。 染色指数是阳性信号和阴性信号差异与阴性…