尹世刚
-
人类免疫细胞T细胞解读及marker
T细胞因成熟于胸腺而得名,主要功能是介导细胞免疫和调节机体的免疫应答。T细胞来源于骨髓干细胞(胚胎期来源于卵黄囊和胚肝),在胸腺中发育和分化。成熟后进入外周免疫器官的胸腺依赖区定居,并循血液->组织->淋巴->血液进行淋巴细胞再循环而遍布全身。外周血中T细胞占淋巴细胞总数的65%~70%。 1 T细胞的分化发育 T细胞的分化发育如下图所示: 图1:T细胞…
-
辅助T细胞基础生物学:分类和功能
从基础研究到临床应用还有很长的路要走,但这也是每个新技术都必须经历的过程,但基础研究必不可少。撰文:挑食的免疫喵 来源:闲谈 Immunology 免疫系统可以抵御广泛的病原体,而最佳的免疫功能需要先天和适应性免疫的协调。先天免疫识别较少,主要针对微生物的保守成分;但适应性免疫,可利用 T 细胞和 B 细胞受体随机重组的特性,产生几乎无限的受体库,对抗病原体。 虽然淋巴细胞受体具有难以置信的多样性…
-
记忆CD8+T细胞分类:表型与功能
本文转载自闲谈Immunology,作者:挑食的喵效应CD8+T(TEFF)是机体最主要的效应细胞,是抗肿瘤免疫和抗感染免疫的主角。但克隆收缩(clonal contraction)机制会诱导效应CD8+T细胞凋亡,避免过激的细胞免疫。肿瘤浸润效应CD8+T细胞本身会发生凋亡,而肿瘤又是一种慢性疾病,因此单纯依靠效应CD8+T细胞不足以诱导肿瘤消除,需要长期存活的记忆CD8+T细胞维持持续的抗肿瘤…
-
T细胞亚群分类图谱
图谱网址:https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=13007 T淋巴细胞(简称T细胞,胸腺依赖性淋巴细胞,T即来源于胸腺英文Thymus的首字母;同理B细胞的B来源于骨髓Bone marrow的首字母)来源于骨髓中的淋巴样祖细胞,在胸腺中分化、发育、成熟。 在胚胎发育早期,T细胞的前体干细胞经血流输送到…
-
T7启动子之体外转录
转录,是指遗传信息从基因DNA转移到RNA,在RNA聚合酶的作用下形成一条与DNA碱基序列互补的mRNA的过程,通常发生在生物体内。如果将含有RNA转录酶、NTP等条件,在体外无细胞系统中,以DNA作为模板,模仿体内转录过程生成RNA的过程被称为体外转录。 体外转录常用于cas9基因敲除鼠构建中,由受精卵原核期至2细胞期发育时间短暂,体内转录时间较长,不能在早期进行基因编辑。这就需要提前通过体外转…
-
免疫荧光实验相关的注意事项汇总
以下文章来源于聊点学术 ,作者Mark 免疫荧光实验原理很简单,其实就是使用荧光二抗,并在荧光显微镜下采集图像,其它的和IHC或ICC区别不大。 但是,想要得到良好的结果却很难,大家经常会遇以下问题: (1)目标蛋白的荧光很弱,导致组间差异并不明显,造成假阴性结果; (2)蛋白荧光太强,甚至形成非特异性的标记,一些背景染色可能被误认为阳性区域,造成假阳性结果; (3)DAPI染细胞核时,加入的试剂…
-
如何做好免疫荧光双标实验?
在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量…
-
如何看待IHC实验的抗原修复环节?
“ 抗原修复是IHC的成败关键。” 在以前的推文中,小编已经把免疫组化(IHC)的实验步骤、细节、常见问题以及IHC图像分析都介绍了(详见往期内容)。IHC实验的大致框架基本完成。今天,小编想就IHC实验中抗原修复环节聊聊,因为这个环节太重要了,不得不详细说明。此外,小编还想给大家推荐一个专业的网站,供大家日常学习和参考。 01 抗原修复的重要性 抗原修复为什么这么重要呢? 首先,由于甲醛固定导致…
-
免疫荧光最全攻略:从protocol到问题解决方案汇总
免疫荧光(Immunofluorescence):简称IF,与western blotting一样,也是根据抗原抗体反应的原理,将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上,与其相应的抗原或抗体结合后,在荧光显微镜下进行观察,从而确定抗原或抗体的性质和定位,包括直接法和间接法。 一、实验步骤 1. 样品准备(贴壁细胞、悬浮细胞以及组织等) (1)对于贴壁细胞: 先将洁净的盖玻片在70%乙醇中…
-
免疫荧光双标实验操作方法与注意事项
在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量…
