尹世刚

本文转载自闲谈Immunology，作者：挑食的喵效应CD8+T（TEFF）是机体最主要的效应细胞，是抗肿瘤免疫和抗感染免疫的主角。但克隆收缩（clonal contraction）机制会诱导效应CD8+T细胞凋亡，避免过激的细胞免疫。肿瘤浸润效应CD8+T细胞本身会发生凋亡，而肿瘤又是一种慢性疾病，因此单纯依靠效应CD8+T细胞不足以诱导肿瘤消除，需要长期存活的记忆CD8+T细胞维持持续的抗肿瘤…

图谱网址：https://www.abcam.com/index.html?pageconfig=resource&rid=13007   T淋巴细胞（简称T细胞，胸腺依赖性淋巴细胞，T即来源于胸腺英文Thymus的首字母；同理B细胞的B来源于骨髓Bone marrow的首字母）来源于骨髓中的淋巴样祖细胞，在胸腺中分化、发育、成熟。 在胚胎发育早期，T细胞的前体干细胞经血流输送到…

转录，是指遗传信息从基因DNA转移到RNA，在RNA聚合酶的作用下形成一条与DNA碱基序列互补的mRNA的过程，通常发生在生物体内。如果将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，以DNA作为模板，模仿体内转录过程生成RNA的过程被称为体外转录。 体外转录常用于cas9基因敲除鼠构建中，由受精卵原核期至2细胞期发育时间短暂，体内转录时间较长，不能在早期进行基因编辑。这就需要提前通过体外转…

以下文章来源于聊点学术 ，作者Mark 免疫荧光实验原理很简单，其实就是使用荧光二抗，并在荧光显微镜下采集图像，其它的和IHC或ICC区别不大。 但是，想要得到良好的结果却很难，大家经常会遇以下问题： （1）目标蛋白的荧光很弱，导致组间差异并不明显，造成假阴性结果； （2）蛋白荧光太强，甚至形成非特异性的标记，一些背景染色可能被误认为阳性区域，造成假阳性结果； （3）DAPI染细胞核时，加入的试剂…

在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记：将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，即可对两种抗原进行定位和定量…

“ 抗原修复是IHC的成败关键。” 在以前的推文中，小编已经把免疫组化(IHC)的实验步骤、细节、常见问题以及IHC图像分析都介绍了(详见往期内容)。IHC实验的大致框架基本完成。今天，小编想就IHC实验中抗原修复环节聊聊，因为这个环节太重要了，不得不详细说明。此外，小编还想给大家推荐一个专业的网站，供大家日常学习和参考。 01　抗原修复的重要性 抗原修复为什么这么重要呢？ 首先，由于甲醛固定导致…

免疫荧光（Immunofluorescence）：简称IF，与western blotting一样，也是根据抗原抗体反应的原理，将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体或抗原上，与其相应的抗原或抗体结合后，在荧光显微镜下进行观察，从而确定抗原或抗体的性质和定位，包括直接法和间接法。 一、实验步骤 1. 样品准备（贴壁细胞、悬浮细胞以及组织等） （1）对于贴壁细胞：  先将洁净的盖玻片在70%乙醇中…

在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时，需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法(double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记：将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，即可对两种抗原进行定位和定量…

导读:  免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种．它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展，该技术已相当成熟。 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。…

细胞铺板密度 上周和果子老师做了一次免疫荧光。我们按我常做的密度铺板，发现第二天细胞就非常满了，说明细胞在不同的实验室环境下生长状态是不一样的。所以建议大家在做细胞铺板时，自己要根据别人的建议摸一个最适的浓度。原则就是细胞一定是单层生长，不要太密。最后可以有单个细胞的存在。细胞只有呈单层并且健康生长时，结果才是比较可信的。因为细胞密集以后，细胞会抑制生长，有些促进凋亡的蛋白就会增加，细胞的周期也会…