DNA专用细胞转染试剂

1. PEI 需要特定的培养基吗？

是的，PEI 与 DNA 形成的复合物对培养基中的成分较为敏感。通常建议在无血清或低血清条件下进行转染，以避免培养基中的蛋白质与复合物发生干扰。完成转染后可以换回含血清的完全培养基以促进细胞的存活和后续生长。

2. PEI 转染后的 DNA 稳定性如何？

 PEI 转染的 DNA 表达一般较短暂，适合于瞬时转染实验。如果需要长期稳定表达，通常需要将转染后的细胞进行筛选，获得稳定表达的细胞株。通过优化实验条件，可以显著提高 PEI 转染的效率和稳定性，同时减少对细胞的毒性影响。

3. 转染形成复合物的时候过量加入的 DNA 和转染试剂的量比较多的时候有沉淀絮状物析出，为什么呢？

在形成 PEI-DNA 复合物时，溶液的 pH 值不稳定可能导致复合物形成不完全或沉淀。也可能是 DNA 的纯度不是很纯，有杂质，某种物质引起的PEI析出浑浊，如果把 DNA 的量降下来会减少这种现象。不建议转染的时候加入过多的质粒和转染试剂。

4. PEI转染质粒失败了，可能有哪些原因？

PEI 是一种阳离子聚合物，碱性条件下容易失去正电荷，从而降低其转染效率。因此，建议调 PH 的时候，尽量避免碱性环境过久停留，若使用氢氧化钠调节之后溶液变浑浊了，建议先可以用盐酸调到 PH 2-3 左右，溶液变为澄清液体，然后再用氢氧化钠调节 PH=7 左右即可。

5. 本产品可以转染 siRNA 吗？

转染 RNA 理论上可以转染，siRNA（小干扰 RNA ）主要用于研究基因功能，与脂质体转染试剂类似，转染试剂的细胞毒性对判定小 RNA 的功能，可能有干扰，需要通过预实验来具体判别。

6. 铺板细胞一定不能加抗生素吗？

PEI 是一个高阳离子聚合物，它能够与细胞膜上的负电荷相互作用，破坏细胞膜的完整性，在接种过程中，细胞的通透性增加，抗生素可能进到细胞内，对细胞状态理论上存在影响，如若必须添加，建议在转染 48h 后加入抗生素。

7. 转染复合物室温可以放多久？

转染复合物的最佳放置时间是 10-20 分钟，长时间放置会显著地降低转染效率，请务必控制放置时间在 20 分钟之内。

SP00501-1500 SP-DNA Transfection Reagent产品说明书.pdf