1. 什么是RPMI 1640培养基？
RPMI 1640是一种广泛应用于细胞培养的培养基，特别适用于悬浮细胞的培养，如淋巴细胞。它最初是为人类白血病细胞系的培养开发的。
2. RPMI 1640培养基的成分特点是什么？
主要成分：RPMI 1640含有葡萄糖、丙酮酸钠、L-谷氨酰胺、酚红等，还含有氨基酸、维生素、无机盐和其他营养成分。
pH缓冲系统：RPMI 1640使用碳酸氢钠作为pH缓冲系统，适合在5% CO2的环境中培养细胞。
3. RPMI 1640与DMEM培养基的主要区别是什么？
用途：RPMI 1640通常用于悬浮细胞，如免疫细胞的培养，而DMEM多用于贴壁细胞。
糖含量：RPMI 1640的葡萄糖浓度为2000mg/L，而DMEM高糖型为4500mg/L，低糖型为1000mg/L。
pH缓冲：RPMI 1640依赖碳酸氢钠系统，而DMEM则通常添加HEPES作为额外的pH缓冲。
4. RPMI 1640的储存条件是什么？
储存温度：一般储存在2-8°C的冰箱中，避免冻融循环。
光敏性：由于含有酚红，需避免长时间暴露在光下，以防止培养基降解。
5. RPMI 1640培养基中是否需要添加血清？
通常需要：大多数细胞培养需要补充10%胎牛血清（FBS）来提供生长因子和其他必要的营养成分。
6. RPMI 1640中L-谷氨酰胺的重要性？
作用：L-谷氨酰胺是细胞生长和代谢所需的关键氨基酸，但其在液体培养基中不稳定，可能在长时间储存或培养过程中降解，因此可以选择使用稳定的谷氨酰胺替代物，如GlutaMAX。
7. 如何应对RPMI 1640中的pH变化？
CO2浓度：确保细胞培养箱内的CO2浓度保持在5%左右，以维持培养基的pH。
更换培养基：如果培养基颜色变黄，表明pH降低，应及时更换培养基。
8. RPMI 1640适用于哪些细胞类型？
适用细胞：RPMI 1640广泛应用于人类淋巴细胞、杂交瘤细胞、一些白血病细胞系等的培养。
9. 如何处理RPMI 1640培养基的污染？
避免污染：操作中严格遵守无菌技术，污染的培养基不可使用，应丢弃处理。
应对措施：如果污染已扩散至细胞培养，可能需要丢弃受影响的细胞，并使用抗生素进行消毒处理或重新复苏细胞库中的细胞。
10. RPMI 1640是否适合所有细胞类型？
不一定：尽管RPMI 1640适合多种细胞类型，但某些细胞可能需要特定成分或其他类型的培养基，实验设计时需根据细胞特性选择合适的培养基。
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