1. 什么是DMEM/F-12培养基？
DMEM/F-12：是将DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）和F-12（Ham’s F-12）按1:1的比例混合而成的一种培养基，结合了两种培养基的优点，提供了更广泛的营养物质，适合多种类型的细胞培养，尤其是贴壁细胞。
2. DMEM/F-12的成分特点是什么？
营养成分：相比于单一的DMEM或F-12，DMEM/F-12含有更多种类的氨基酸、维生素和激素，适合多种哺乳动物细胞的生长。
适用细胞类型：广泛用于贴壁细胞、肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
3. DMEM/F-12与DMEM的主要区别是什么？
营养物质含量：DMEM/F-12中添加了更多的营养物质，如传代细胞和初代培养时，可能比单独的DMEM更加适合。
细胞适用性：DMEM/F-12对于一些难以培养的细胞系（如上皮细胞、星形胶质细胞等）有更好的效果。
4. DMEM/F-12的储存条件是什么？
储存温度：通常在2-8°C冰箱中保存，避免反复冻融。
光敏性：由于含有酚红，应避免长期暴露在光下以防止成分降解。
5. 为什么选择使用DMEM/F-12？
多样化细胞类型：DMEM/F-12可以用于多种细胞类型的培养，尤其是需要复杂营养环境的细胞。
灵活性：它可以支持不同种类细胞在同一实验中的应用，节省实验时间和资源。
6. DMEM/F-12中是否需要添加血清？
一般需要：大多数细胞培养需要添加10%胎牛血清（FBS），但也可根据实验需求使用无血清培养，或添加其他特定的生长因子。
7. DMEM/F-12培养基中L-谷氨酰胺的重要性？
L-谷氨酰胺的作用：它是细胞增殖和代谢的关键，尤其是在快速生长的细胞中，但容易降解，可以选择稳定的替代品如GlutaMAX以减少培养过程中的L-谷氨酰胺降解。
8. 如何应对DMEM/F-12中的pH变化？
CO2环境：保持培养箱内5% CO2浓度，确保碳酸氢钠缓冲系统有效工作。
及时更换培养基：如果培养基颜色变黄，表明pH降低，应及时更换。
9. DMEM/F-12的适用细胞类型有哪些？
常见适用细胞：上皮细胞、神经元细胞、干细胞、肿瘤细胞、原代细胞等。
10. 如何处理DMEM/F-12培养基的污染？
避免污染：操作过程中严格遵守无菌技术，使用无菌过滤器（0.22 µm）过滤培养基以防污染。
污染应对措施：一旦发现污染，应立即丢弃污染的培养基并重新制备培养基，确保无菌环境下操作细胞。
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