一、什么是外泌体？

外泌体是由活细胞经过内吞、融合、释放形成的细胞外囊泡，具有磷脂双分子层结构，直径30–150nm。

携带多种蛋白质、mRNA、miRNA、脂质等物质，广泛参与细胞间物质运输与信息传递，调控生理与病理过程。

二、外泌体提取工艺

1. 超速离心法

原理：利用颗粒大小/密度差异，逐级离心去除杂质，超高速离心沉淀外泌体。

纯度较高
得率较低

适用：基础研究、对纯度有一定要求的实验。

2. 密度梯度离心法（金标准）

原理：在超速离心基础上，用蔗糖/碘克沙醇形成密度梯度，精准分层分离。

纯度最高
结果精准

适用：体内实验、深度测序等高要求场景。

3. 聚合物沉淀法（PEG法）

原理：破坏水化层促使外泌体聚集沉淀，操作简便快速。

得率高
速度快
含少量杂质

适用：批量快速筛查、初步检测。

三、鉴定与质量控制

1. 形态与粒径

透射电镜：杯状圆形/类圆形膜囊泡，双膜结构清晰。

粒径范围：30–150nm，主峰80–120nm，提供颗粒浓度（particles/mL）。

2. 蛋白含量检测

采用：BCA法 / Bradford法，精确定量总蛋白。

3. 标志物蛋白（必检）

阳性标志物：CD9/CD63/CD81（≥2个）；Alix/Tsg101（≥1个）

阴性标志物：Calnexin/Histone H3/GM130（≥2个）

4. 分泌因子定制检测

qPCR检测：VEGF、FGF、IGF、HGF、EGF、BDNF、GDNF、NGF、GAPDH等。

四、项目交付与周期

标准交付物

• 完整实验报告
• 原始数据
• 鉴定图片/图谱
• 剩余样品

实验周期

基础鉴定：4–8周（自收到样本起）

增值服务（功能实验、测序等）周期相应延长。

五、客户案例