1. 什么是MEMα培养基?
MEMα培养基:MEMα是经典的Minimum Essential Medium(MEM)培养基的改良版本,设计用于培养各种哺乳动物细胞,特别是哺乳动物成纤维细胞、胚胎细胞和肿瘤细胞。它含有额外的氨基酸、维生素和其他营养物质,适合更多样化的细胞培养需求。
2. MEMα培养基的主要成分是什么?
成分特点:MEMα包含多种氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖和其他成分,并且通常含有核苷酸(如腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷和胸苷)以支持细胞DNA和RNA合成。
无酚红版本:MEMα可以根据实验需求选择含或不含酚红的版本,以避免对某些实验指标的干扰。
3. MEMα与其他培养基(如DMEM、RPMI 1640)的区别是什么?
营养成分:MEMα在成分上比经典MEM更加丰富,含有额外的氨基酸和维生素,这使其适合更广泛的细胞类型。与DMEM相比,MEMα的营养成分较少,但更适合对营养需求较低或中等的细胞。
应用范围:MEMα常用于培养需要较低营养水平的细胞,特别是在对生长因子或激素依赖性较低的情况下。
4. MEMα培养基的储存条件是什么?
储存温度:MEMα应保存在2-8°C的冰箱中,避免反复冻融。
光敏性:如果MEMα培养基中含有酚红,应避免长时间暴露在光线下,以防止成分降解。
5. MEMα培养基中是否需要添加血清?
通常需要:大多数细胞培养需要添加胎牛血清(FBS)以提供生长因子和其他必需的营养物质。血清浓度通常为5-10%,但具体用量应根据实验需求调整。
6. MEMα中L-谷氨酰胺的重要性?
L-谷氨酰胺的作用:L-谷氨酰胺是细胞增殖和代谢所需的重要氨基酸,但在培养基中不稳定,容易降解。为保持MEMα培养基的稳定性,建议使用稳定的替代品,如GlutaMAX。
7. 如何应对MEMα中的pH变化?
CO2环境:在5% CO2的培养环境中,MEMα的碳酸氢盐缓冲系统可以有效维持pH稳定。
及时更换培养基:如果发现培养基颜色变黄(表明pH值降低),应及时更换培养基。
8. MEMα适用于哪些细胞类型?
常见适用细胞:MEMα广泛用于培养哺乳动物成纤维细胞、胚胎细胞、肿瘤细胞和一些神经细胞。它特别适合培养那些对营养需求适中且需要额外核苷酸支持的细胞。
9. 如何处理MEMα培养基的污染?
避免污染:操作中应严格遵守无菌技术,使用无菌过滤器(0.22 µm)过滤培养基,以减少污染风险。
应对措施:如果发现培养基污染,应立即丢弃污染的培养基,重新制备并确保无菌操作环境。
10. MEMα培养基的常见应用有哪些?
常见应用:MEMα常用于细胞生物学研究、肿瘤细胞培养、药物筛选和基因研究中,特别适合需要额外核苷酸和中等营养水平的细胞系。