Trypsin Solution

Trypsin Solution

Trypsin,胰蛋白酶,经过 0.1μm 过滤除菌,是实验室细胞培养中解离贴壁细胞的经典试剂。

 

价格¥56.00
货号: SP00201 / SP00202 / SP00203 / SP00204 / SP00205 分类: ,

Trypsin Solution 产品详情

Trypsin,胰蛋白酶,一种丝氨酸水解酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶溶液分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关,在PH 8.0和37℃时,胰酶的作用能力最强,因此使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。

一般常用胰酶溶液的工作浓度为0.25%,而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度(0.05%)的胰酶进行细胞消化。EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+,从而破坏细胞连接促进细胞的解离,因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用,以增强解离效果。

产品为即用型,已经过滤除菌,可直接使用,使用前无需稀释或过滤除菌等任何处理,使用时应注意无菌操作,避免污染。

 


Trypsin Solution  产品优势

  • 活性保障: 严格控制酶活力,确保消化迅速、彻底,减少对细胞的机械损伤。
  • 规格多样: 提供 0.25%(常规型)与 0.05%(温和型)两种浓度,满足从坚韧组织到敏感细胞的不同消化需求。
  • 组分灵活:

           含 EDTA 组分: 加入螯合剂 EDTA,协同增强消化效果,特别适用于难消化的贴壁细胞。

           含酚红组分: 内置 pH 指示剂,方便通过颜色变化实时监测溶液状态。

  • 即开即用: 1X 工作液浓度,无需稀释,避免二次污染,保障实验的一致性。

Trypsin Solution 产品组分

指标 SP00201-0100 SP00202-0100 SP00203-0100 SP00204-0100 SP00205-0100
外观 液体 液体 液体 液体 液体
溶剂 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS 10 mM PBS
胰蛋白酶浓度 2.5 g/L 2.5 g/L 2.5 g/L 2.5 g/L 0.5 g/L
EDTA•2Na 0.2 g/L / 0.2 g/L / 0.2 g/L
酚红指示剂 / / 10 mg/L 10 mg/L 10 mg/L

 


Trypsin Solution 储存条件

储存条件:-5~-20℃避光保存

运输条件:冰袋 or 干冰

有效期:自生产之日起12个月

 

1. 使用胰蛋白酶时的注意事项有哪些?

消化时间控制:胰蛋白酶消化过长时间可能会损伤细胞,导致细胞膜受损或死亡。消化时间应根据细胞类型进行优化,通常为2-10分钟。胰蛋白酶中和:胰蛋白酶消化后,通常需要用含血清的培养基中和胰蛋白酶的活性,以防止继续消化细胞。


2. 胰蛋白酶对不同细胞类型的适用性如何?

适用性:胰蛋白酶适用于大多数贴壁细胞的消化和分离,尤其是哺乳动物细胞。然而,一些细胞(如干细胞或敏感细胞)可能对胰蛋白酶敏感,需要降低浓度或缩短消化时间。替代方法:对于非常脆弱的细胞,可能需要使用更温和的消化酶,如胶原酶或木瓜蛋白酶。


3. 如何判断胰蛋白酶消化是否完成?

显微镜观察:消化过程中,可以使用显微镜观察细胞是否已从培养瓶底部分离。一般贴壁细胞会圆形化并开始浮动,这时消化基本完成。及时中和:当细胞大部分脱离培养基底时,应立即加入含血清的培养基中和胰蛋白酶,防止过度消化。


4. 如何应对胰蛋白酶消化过程中出现的问题?

消化不完全:如果消化不完全,可以稍微延长消化时间或轻轻拍打培养瓶以加速细胞脱离。细胞损伤:如果发现细胞在消化后活性显著下降,可能需要缩短消化时间,或者尝试降低胰蛋白酶浓度。


5. 如何处理胰蛋白酶的污染?

避免污染:胰蛋白酶溶液应在无菌条件下制备和使用,并存放在无菌环境中。应对措施:如果发现胰蛋白酶污染,应立即丢弃受污染的溶液,并准备新的无菌胰蛋白酶。使用过程中,确保无菌操作,以防止细胞培养的交叉污染。


6. EDTA的浓度对胰蛋白酶消化有何影响?

EDTA的作用:EDTA通过螯合钙离子,破坏细胞间连接,帮助胰蛋白酶更有效地分离细胞。EDTA浓度通常为0.02-0.05 mM,可以显著增强胰蛋白酶的消化效果。

成分(胰酶浓度)

0.05%, 0.25%

成分(酚红)

含酚红, 不含酚红

成分(EDTA)

含EDTA, 不含EDTA

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