1. 什么是Leibovitz's L-15培养基?
Leibovitz's L-15培养基:L-15培养基是一种特殊设计的无CO2环境培养基,适用于在开放式或低CO2环境中培养哺乳动物细胞。它最初设计用于支持各种细胞系在室温或低CO2条件下的生长。
2. Leibovitz's L-15培养基的主要成分是什么?
成分特点:L-15培养基中含有高浓度的氨基酸、维生素、盐类和高糖浓度。它还含有牛磺酸、胱氨酸等补充成分,支持细胞在非CO2培养条件下生长。
无碳酸氢盐:与大多数培养基不同,L-15培养基不依赖碳酸氢盐作为缓冲系统,因此无需在CO2培养箱中使用。
3. Leibovitz's L-15与其他培养基(如DMEM、RPMI 1640)的区别是什么?
无CO2需求:L-15培养基特别设计用于在开放系统中工作,无需CO2环境,而DMEM和RPMI 1640则需要在CO2培养箱中使用。
缓冲系统:L-15依赖其他缓冲系统(如磷酸盐缓冲)来维持pH稳定,而不是碳酸氢盐缓冲。
4. Leibovitz's L-15培养基的储存条件是什么?
储存温度:L-15培养基应保存在2-8°C的冰箱中,避免反复冻融。
光敏性:如果培养基含有酚红,避免长时间暴露在光线下,以防止成分降解。
5. Leibovitz's L-15培养基中是否需要添加血清?
通常需要:大多数细胞培养需要添加胎牛血清(FBS)以提供生长因子和其他必需的营养物质。血清浓度通常为5-10%,但具体用量应根据实验需求调整。
6. Leibovitz's L-15中L-谷氨酰胺的重要性?
L-谷氨酰胺的作用:L-谷氨酰胺是细胞生长和代谢的重要成分,但在培养基中不稳定,容易降解。可以选择添加稳定的谷氨酰胺替代品,如GlutaMAX,以维持培养基的有效性。
7. 如何应对Leibovitz's L-15中的pH变化?
稳定性:由于L-15培养基不依赖CO2环境,因此其pH相对稳定,在开放环境中更容易维持。
及时更换培养基:如果培养基颜色变黄(表明pH值降低),应及时更换培养基。
8. Leibovitz's L-15适用于哪些细胞类型?
常见适用细胞:L-15培养基广泛用于培养如猴肾细胞(LLC-MK2)、人类结肠癌细胞(HCT-116)、鱼类细胞和其他适合开放式培养系统的细胞。
9. 如何处理Leibovitz's L-15培养基的污染?
避免污染:操作中严格遵守无菌技术,使用无菌过滤器(0.22 µm)过滤培养基,以减少污染风险。
应对措施:如果发现培养基污染,应立即丢弃污染的培养基,重新制备并确保无菌操作环境。
10. Leibovitz's L-15培养基的常见应用有哪些?
常见应用:Leibovitz's L-15培养基常用于培养哺乳动物细胞和鱼类细胞,特别是在非CO2环境或低氧条件下的细胞研究中。