SPE-无血清细胞冻存液【低毒性】是一种无血清低DMSO细胞冻存液,不需要程序性降温。仅含有5%的二甲基亚砜(DMSO),配方成分明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。此冻存液可提高细胞活率,不仅适用于常规细胞、原代细胞,同时亦适合于无血清培养细胞和蛋白表达细胞等培养。
产品特点:
- 即用型细胞冻存液
- 无需程序性降温,直接放入-80℃冰箱,节省大量的时间和精力
- 不含血清,批次间差异小
- 低毒性,二甲基亚砜(DMSO)含量为5%
- 细胞存活率高,适用于大多数哺乳动物细胞的冻存
- 成分明确,没有添加任何外源蛋白,减少细胞污染机会,同时减少外源蛋白对细胞正常生长和分化的影响
操作步骤:
(一)细胞冻存
- 选择对数生长期的贴壁细胞或悬浮细胞(细胞汇合度80%-90%左右),收集细胞并将细胞制备成单细胞悬液,计数;
- 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数量;
- 将细胞悬液以1000r/min 离心 5min,弃上清;
- 向细胞沉淀物中加入细胞冻存液,轻轻吹打,使细胞密度达到5×105~1×10⁷cells/mL;
- 将上述细胞悬液按1mL左右分装至冻存管中,并做好标记;
- 将细胞冻存管直接置于-80℃冰箱中,长期冷冻保存。若需转移至液氮,需在-80℃冰箱放置至少24h后再转移至液氮长期保存。
(二)细胞复苏
- 从-80℃冰箱或液氮罐中取出冻存细胞,立即放入37℃水浴锅中进行快速解冻(操作中注意防止管口污染);
- 待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即将其转移至预先装有5mL左右细胞培养基的离心管中,并轻微吹打混匀,于1000r/min 离心 5min,弃上清;
- 加入适量完全培养基重悬细胞,按照所需接种密度将细胞接种到合适的细胞培养容器中,并加入新鲜的完全培养基,轻轻摇晃使细胞分布均匀,置于37℃、饱和湿度的细胞培养箱中培养;
- 后续根据研究需要和方法进行常规培养。
注意事项:
- 冻存细胞分装至冻存管后,应尽快转移到-80℃冰箱,减少在室温或4℃存放时间;
- 对于原代胚胎干细胞或iPS细胞或其它珍贵细胞样本等冻存时,建议在使用前对所冻存的细胞进行至少为期1周的细胞冻存测试实验,确认性能后再进行正式冻存;
- 含有5% DMSO,部分对DMSO敏感的细胞,建议对其进行至少为期1周的冻存测试实验,确认性能后再正式冻存;
- 本产品经多次22μm 过滤除菌,使用本产品时应注意无菌操作,避免污染;
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
- 本产品仅用于科研用途,不可用于诊断、治疗、临床及其他用途。
免责声明:本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。