Sperikon提供科研级重组蛋白表达与小规模纯化CRO服务，覆盖E.coli原核表达、HEK293T真核瞬时表达、 蛋白粗提、精纯、换液、浓缩、分装及基础质控检测。
针对不同目标蛋白的序列特征、表达难度、标签设计和后续应用需求，我们可协助客户制定表达系统选择、纯化 策略和质控方案。
工作流程
服务详情
| 阶段 | 服务内容 | 交付物 | 周期 |
|---|---|---|---|
| 项目评估 | 目标蛋白序列分析、表达系统建议、标签策略、纯化路线评估 | 技术评估意见、推荐表达方案 | 2-3 个工作日 |
| 质粒构建 | 基因合成、密码子优化、表达载体构建、质粒制备、测序确认 | 表达质粒、测序报告、质粒信息 | 2-4 周 |
| E. coli 原核表达 | 转化、小试表达、诱导条件优化、可溶性/包涵体分析、小规模表达 | 表达检测结果、菌体/裂解液、放大建议 | 2-3 周 |
| HEK293T 真核表达 | 293T 瞬时转染、分泌蛋白表达、细胞上清或裂解液收集、表达检测 | 表达上清、细胞裂解液、表达检测结果 | 5-8 周 |
| 蛋白纯化 | 亲和层析、离子交换、SEC/HPLC、标签切除、复性探索、脱盐换液、浓缩分装 | 纯化蛋白、浓度、体积、缓冲液信息 | 2-4 周 |
| 质控交付 | SDS-PAGE、BCA/UV、WB、SEC-HPLC、LC-MS、活性检测等 | COA/项目报告、胶图、检测数据、保存建议 | 根据项目增加 1-4 周 |
*备注：实际周期将根据目标蛋白序列、表达系统、纯化难度、质控项目和客户交付要求进行评估确认。
案例研究
T4 DNA 连接酶原核表达与纯化
T4 DNA 连接酶是分子克隆、载体构建和 DNA 片段连接实验中的常用工具酶。本案例基于 E. coli 原核表达体系进行 T4 DNA 连接酶表达，并通过亲和纯化、浓缩处理和 SDS-PAGE 检测，评估目标蛋白表达与纯化效果。
技术路线
实验结果展示
Figure A. T4 DNA 连接酶的原核表达验证
SDS-PAGE 结果显示，IPTG 诱导后样品在约 55-60 kDa 位置出现目标蛋白条带，而未诱导样品在该位置无明显条带，提示 T4 DNA 连接酶在 E. coli 中获得可检测表达。
Figure B. T4 DNA 连接酶亲和纯化与咪唑洗脱分析
亲和纯化结果显示，目标蛋白主要分布于 200 mM 咪唑洗脱组分 Lane 6、7，穿透液及低浓度咪唑洗脱组分中目标条带较弱，说明镍柱亲和纯化可有效富集目标蛋白。
Figure C. 纯化浓缩后 T4 DNA 连接酶样品分析
浓缩后样品在目标分子量附近呈现清晰条带，背景杂蛋白条带减少，说明纯化和浓缩处理后目标蛋白得到进一步富集。